Membuat Sediaan Jamur

MEMBUAT SEDIAAN JAMUR

TUJUAN: - Melatih cara pembuatan sediaan semi permanen langsung dari bahan.

- Melakukan identifikasi genus/ spesies jamur dari sediaan yang dibuat.

PRINSIP: Jamur diperiksa secara macros & micros pada sediaan dengan menggunakan obyektif 10x atau 40x menggunakan pengecatan LPCB & Tinta Parker

BAHAN: 1. Koloni jamur tempe

2. Koloni jamur jagung

3. Koloni jamur roti

4. Koloni jamur tape

REAGEN:              - Alkohol 70%

-    Larutan Lactophenol (LPCB)

-    Kutex/ Canada Balsam/ Entelan.

ALAT      :               - Ohse jarum

-    Cellophane tape

-    Kaca Objek & kaca tutup

-    Pembakar spirtus

-    Pipet tetes

CARA KERJA:          Identifikasi mikroskopik dengan larutan lactophenol

a.             Membuat sediaan semi permanen dari koloni  jamur

1.       Siapkan kaca objek glass dari kaca tutup yang bersih.

2.       Kemudian ambil koloni dengan ohse jarum, letakkan pada kaca objek.

3.       Tambahkan 1 tetes alcohol 70% dan koloni dihancurkan sampai menjadi serpihan yang halus. Sebelum mongering diberi 1-2 tetes larutan Lactophenol/ LPCB dan proses penghancuran koloni dilanjutkan kembali.

4.       Semakin halus serpihannya maka hasilnya semakin baik..

5.       Ditutup dengan kaca tutup secara perlahan-lahan dan jangan sampai terbentuk gelembung udara.

6.       Sediaan diperiksa dengan pembesaraan 100x dan 400x.

b.            Membuat sediaan jamur dengan KOH 10%

1.       Siapkan kaca objek glass dan kaca tutup yang bersih.

2.       Kemudian ambil koloni dengan ohse jarum, letakkan pada kaca objek.

3.       Tambahkan 1 tetes alcohol 70% dan koloni dihancurkan sampai menjadi serpihan yang halus. Sebelum mengering diberi 1-2 tetes larutan KOH 10% dan proses penghancuran koloni dilanjutkan kembali.

4.       Semakin halus serpihannya maka hasilnya semakin baik.

5.       Ditutup dengan kaca tutup secara perlahan-lahan dan jangan sampai terbentuk gelembung udara.

6.       Panaskan di atas api spirtus jangan sampai mendidih.

7.       Sediaan diperiksa dengan pembesaran 100x dan 400x.

c.             Membuat sediaan jamur semi permanen memakai cellophane tape

1.       Siapkan cellophane tape yang mempunyai daya rekat kuat dan tidak  mudah melipat. Dipotong berukuran 1-1,5 cm.

2.       Kemudian dengan memakai  pinset rekatkan pada koloni jamur

3.       Bagian yang terdapat jamur diberi 1-2 tetes alcohol 70%

4.       Kaca objek diberi 1-2 tetes larutan Lactophenol/ LPCB dan cellophane tape yang mengandung jamur diletakkan secara perlahan-lahan.

5.       Ditutup dengan kaca penutup secara perlahan-lahan dan jangan sampai terbentuk gelembung udara.

6.       Sediaan diperiksa dengan pembesaran 100x dan 400x

7.       Kelebihan LPCB dikeringkan dengan kertas saring kemudian sediaan ditutup dengan kuteks atau Canada balsam/ entelan dan dapat disimpan dalam waktu  yang lama bila tidak terjadi  gelembung udara dan kebocoran.

8.       Untuk  mendapatkan hasil sediaan semi permanen yang baik, sediaan dibiarkan beberapa hari agar jamur melekat pada kaca objek  dan kaca tutup, baru ditutup dengan kuteks/ Canada Balsam/ Entelan.

Nb: gunakan cellophane tape pada jamur roti dan jagung karena tekstur yang halus.

Alkohol berguna untuk meluruhkan jaringan.